miRNA能抑制其他基因的表达,并且参与众多的生物学过程,包括细胞增殖、凋亡、细胞分化和发育。
本书介绍了miRNA的基本概念;闸述了关于miRNA预测筛选、分离和测定的多种先进的技术和方法;提供了包括在植物、线虫、果蝇、鱼、鸡、小鼠和人类等一些物种中使用的多样化、新颖和有价值的miRNA技术,并且说明了作为潜在的药物设计下具如何使用这些技术研发miRNA。另外,还对基因凋控、小RNA功能、RNA干扰机制和转基因遗传学等内容进行了介绍。
本书对每种方法都提供了step-by-step的实验指导,每种方法均概述了原理,列出了所需的仪器设备和试剂,提供了实验步骤,并对实验中的疑难和如何避免失误进行了提示。
本书包括:
最新、最先进的m:RNA研究方法和技术
易子掌握的体内、体外miRNA功能测定方法
利用miRNA技术制作的转基因动物模型
计算机分析预测m:RNA和m:RNA分离技术
疾病分子发病机制和设计新治疗策略的研究进展
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第1章 microRNA——调控基因功能的RNA基因概述1
第2章 microRNA前体结构分析17
第3章 microRNA的生物形成——分离与鉴定微处理体复合物31
第4章 primiRNA转录物的识别与切割47
第5章 以小鼠胚胎干细胞为遗传系统模型探索RNA干扰机制55
第6章 microRNA与信使RNA的转归70
第7章 microRNA靶位点预测83
第8章 人类microRNA靶位点预测98
第9章 哺乳动物microRNA靶位点预测的复杂性110
第10章 miRBase——microRNA序列数据库121
第11章 microRNA表达谱高通量分析方法131
第12章 应用原位杂交技术研究microRNA在植物发育中的作用148
第13章 使用荧光素酶报告系统验证siRNA有效性170
第14章 克隆哺乳动物组织中的microRNA178
第15章 分析造血系统分化中microRNA表达及功能的方法200
第16章 果蝇细胞死亡过程中microRNA调节子的鉴定219
第17章 microRNA在HIV感染中的作用230
第18章 HIV1编码的microRNA分子的克隆及检测243
第19章 脆性X染色体智力迟钝蛋白相关mRNA及microRNA的鉴定255
第20章 应用果蝇S2细胞裂解产物体外分析microRNA前体的剪切过程265
第21章 用慢病毒RNA干扰表达载体下调人Cdc6蛋白275
第22章利用内含子microRNA进行体内或体外基因沉默282
第23章 分离和识别基因特异性microRNA300
第24章 利用内含子microRNA的转基因样动物模型308
第25章 miRNA的进化322
第26章 展望338
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